Estudo da utilização de heme por Paracoccidioides lutzii: análise do proteoma de parede celular após exposição à hemoglobina e expressão heteróloga de Pga7, um provável receptor de hemoglobina

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dc.contributor.advisor-co1Paccez, Juliano Domiraci
dc.contributor.advisor-co1Latteshttp://lattes.cnpq.br/2350706025601982por
dc.contributor.advisor1Soares, Célia Maria de Almeida
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/8539946335852637por
dc.contributor.referee1Soares, Célia Maria de Almeida
dc.contributor.referee2Oliveira, Rosely Maria Zancopé
dc.contributor.referee3Bailão, Mirelle Garcia Silva
dc.creatorSouza, Aparecido Ferreira de
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/9198512051100372por
dc.date.accessioned2017-03-07T15:14:15Z
dc.date.issued2017-02-21
dc.description.abstractIron (Fe) is an indispensable metal for most biological systems and is a target of competition in host-pathogen interactions. In humans, most Fe is complexed to the cofactor heme, present in hemoglobin, a molecule that is exploited by pathogens as an iron source. Paracoccidioides spp., a complex of thermodymorphic pathogenic fungi, are the etiological agents of paracoccidioidomycosis (PCM), a systemic mycosis endemic in Latin America. Paracoccidioides spp. are able to use hemoglobin in a receptor(PbRbt5)-mediated process. However experimental evidence points to the existence of a complex system with the presence of other proteins. In the present work, we demonstrated the similarity between PAAG_02225 (PbPga7), from Paracoccidioides lutzii, and the sequence of the heme/hemoglobin receptor Pga7 from Candida albicans, and expressed PbPga7 in Escherichia coli. Due to the presence of rare codons in P. lutzii sequence, compared to the codons preferably used by Escherichia coli, chemical synthesis of the gene was employed. The expression of PbPga7 protein opens perspectives for PbPga7 characterization. In addition, nanoUPLC-MSE was employed to analyze P. lutzii cell wall proteome. We observed that the treatment of fungus with hemoglobin promotes induction of potential adhesins and defense-related enzymes against reactive oxygen species. These data indicate that these proteins may be important for the pathogen to access hemoglobin by adhering and lysing erythrocytes, besides counteracting the toxicity generated by heme/hemoglobin released from erythrocytes, allowing the uptake and use of these molecules. The results obtained in the present work reinforce the complexity of the interaction event between pathogen and host and, in addition, contribute to broaden the understanding of the biology of Paracoccidioides spp.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2017-03-07T13:37:49Z No. of bitstreams: 4 Dissertação - Aparecido Ferreira de Souza - 2017 - Parte 01.pdf: 17508857 bytes, checksum: 1d04cb16c6e33e54fe0304cecb5e491b (MD5) Dissertação - Aparecido Ferreira de Souza - 2017 - Parte 02.pdf: 14162361 bytes, checksum: b19921eb48893ef7a1aa4ddc2a2e1553 (MD5) Dissertação - Aparecido Ferreira de Souza - 2017 - Parte 03.pdf: 17178000 bytes, checksum: aaf5cfd215078190a7900eafd1e47790 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)eng
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dc.description.resumoO Ferro (Fe) é um metal indispensável para a maioria dos sistemas biológicos e é alvo de competição em interações patógeno-hospedeiro. Em humanos, a maioria do Fe encontra-se complexada ao cofator heme, presente na hemoglobina, uma molécula que é explorada por patógenos como uma fonte de Fe. Paracoccidioides spp., um complexo de fungos patogênicos termodimórifocos, são agentes etiológicos da paracoccidioidomicose (PCM), uma micose sistêmica endêmica na América Latina. Paracoccidioides spp. é hábil em utilizar hemoglobina por um processo mediado por receptor (PbRbt5). Contudo, evidências experimentais apontam para a existência de um sistema complexo com a presença de outras proteínas. No presente trabalho, foi demonstrada a similaridade de PAAG_02225 (PbPga7), de Paracoccidioides lutzii, com a sequência do receptor de heme/hemoglobina Pga7 de Candida albicans. A expressão heteróloga de PbPga7 foi realizada em Escherichia coli. Devido a presença de códons raros na sequência de P. lutzii, comparados aos códons utilizados preferencialmente por E. coli, a síntese química do gene foi empregada. A expressão da proteína PbPga7 abre perspectivas para estudos de caracterização da mesma. Adicionalmente, nanoUPLC-MSE foi utilizada para analisar o proteoma de parede celular de P. lutzii. Observou-se que o tratamento do fungo com hemoglobina promove a regulação positiva de potenciais adesinas e enzimas relacionadas com a defesa contra espécies reativas de oxigênio. Estes dados indicam que estas proteínas podem ser importantes para que o patógeno possa acessar a hemoglobina, aderindo e lisando eritrócitos, além de contrapor a toxicidade gerada pelo heme/hemoglobina liberados, permitindo a captação e utilização dessas moléculas. Os resultados obtidos no presente trabalho reiteram a complexidade do evento de interação entre patógeno e hospedeiro e, adicionalmente, contribuem para a ampliação do entendimento da biologia de Paracoccidioides spp.por
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESpor
dc.description.sponsorshipConselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqpor
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEGpor
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationSOUZA, A. F. Estudo da utilização de heme por Paracoccidioides lutzii: análise do proteoma de parede celular após exposição à hemoglobina e expressão heteróloga de Pga7, um provável receptor de hemoglobina. 2017. 99 f. Dissertação (Mestrado em Genética e Biologia Molecular) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2017.por
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/6911
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáspor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.departmentInstituto de Ciências Biológicas - ICB (RG)por
dc.publisher.initialsUFGpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Genética e Biologia Molecularpor
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectParacoccidioidomicosepor
dc.subjectFerropor
dc.subjectNanoUPLC-MSEpor
dc.subjectAdesinaspor
dc.subjectInterações patógeno-hospedeiropor
dc.subjectParacoccidioidomycosiseng
dc.subjectIroneng
dc.subjectNanoUPLC-MSEeng
dc.subjectAdhesinseng
dc.subjectHost-pathogen interactionseng
dc.subject.cnpqCIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICApor
dc.titleEstudo da utilização de heme por Paracoccidioides lutzii: análise do proteoma de parede celular após exposição à hemoglobina e expressão heteróloga de Pga7, um provável receptor de hemoglobinapor
dc.title.alternativeStudy of the use of heme by Paracoccidioides lutzii: analysis of the cell wall proteome after exposure to hemoglobin and heterologous expression of Pga7, a probable hemoglobin receptoreng
dc.typeDissertaçãopor

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