Desenvolvimento de marcadores microssatélites para Stryphnodendron adstringens (barbatimão - Fabaceae)

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dc.contributor.advisor1Telles, Mariana Pires de Campos
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/4648436798023532eng
dc.contributor.referee1Brito, Cíntia Pelegrineti Targueta de Azevedo
dc.contributor.referee2Soares, Thannya Nascimento
dc.contributor.referee3Telles, Mariana Pires de Campos
dc.creatorBarateli, Luciana Oliveira
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/0489837542400486eng
dc.date.accessioned2018-11-05T14:49:58Z
dc.date.issued2018-08-27
dc.description.abstractStryphnodendron adstringens presents a wide geographical distribution, being predominant in regions of Cerrado sensu stricto and is popularly known as "barbatimão". It is a species widely used in herbal medicine because of its anti-inflammatory, antibacterial and antiulcerogenic potential. The Cerrado’s removal of vegetation cover reduces significantly the number of several native species, among them S. adstringens. Thus, it is important that efficient strategies for the use and conservation of this species are drawn. In order to provide molecular tools for studies of genetic diversity and conservation of S. adstringens, the present work had the objective of developing microsatellite markers for the species. Genomic DNA was obtained from leaf tissue using the CTAB protocol. The identification of the microsatellite regions and the design of the primers were performed using the QDD program modules. From the identified microsatellite regions, 20 pairs of primers were designed, 14 of which flank microsatellite regions composed of dinucleotides, four by tetranucleotides and two by pentanucleotides. Initially, four individuals were used for the standardization tests of the PCR protocol and annealing temperatures. Subsequently, 48 individuals were selected, distributed in three populations, to evaluate polymorphism via 6% polyacrylamide gel. Of the 20 pairs of primers evaluated, 16 presented polymorphic amplification products and four monomorphic amplification products. Considering the 16 polymorphic markers, the number of alleles varied between two (SadH19) and 13 (SadH13), with a mean of seven alleles per locus. The observed heterozygosity (Ho) and expected (He) and PIC values were 0.506, 0.543, 0.635, respectively. The mean Hmax value founded (65,519) indicates values of genetic diversity that can be considered medians for this set of loci evaluated in three populations of S. adstringens. On the other hand, although genetic diversity is median, this set of 16 polymorphic markers exhibited a ombined probability of paternity exclusion high (0.9999983) and combined probability of genetic identity low (3,49x10-15). The analysis of variance of allelic frequencies presented significant values for two of the three estimated statistics with f not significant 0.050, significant θ equal to 0,329 and F in the overall value also significant 0.360. Thus, it can be concluded that the panel of polymorphic markers developed for S. adstringens is highly informative and indicated for population genetic studies for the species. Another important factor is that these markers can be tested in other evolutionarily close species for the availability of microsatellite markers, without the need to develop new primers.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2018-11-05T13:39:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Luciana Oliveira Barateli - 2018.pdf: 3641421 bytes, checksum: a96d12f5fce8d5c02a9793dec50ebfbf (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)eng
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dc.description.resumoStryphnodendron adstringens apresenta ampla distribuição geográfica, sendo predominante em regiões de Cerrado stricto sensu e é conhecida popularmente como “barbatimão”. É uma espécie utilizada na medicina fitoterápica por seu potencial anti-inflamatório, antibacteriano e antiulcerogênico. A retirada de cobertura vegetal do Cerrado diminui significativamente o número de diversas espécies nativas, dentre elas S. adstringens. Dessa forma, é importante que sejam traçadas estratégias eficientes para o uso e a conservação dessa espécie. A fim de disponibilizar ferramentas moleculares para estudos de diversidade genética e conservação de S. adstringens, o objetivo desse estudo foi desenvolver marcadores microssatélites e estimar o potencial informativo desses marcadores para subsidiar estudos de genética populacional da espécie. A identificação das regiões microssatélites e o desenho dos primers foram realizados usando o programa QDD. Inicialmente, foram utilizados quatro indivíduos para os testes de padronização do protocolo de PCR e temperaturas de anelamento. Posteriormente, foram selecionados 48 indivíduos, provenientes de três populações, para avaliação de polimorfismo via gel de poliacrilamida a 6%. A partir das regiões microssatélites identificadas, foram desenhados 20 pares de primers, sendo que 14 flanqueiam regiões microssatélites compostas por dinucleotídeos, quatro por tetranucleotídeos e dois por pentanucleotídeos. Dos 20 pares de primers avaliados, 16 apresentaram produtos de amplificação polimórficos e quatro monomórficos. Considerando os 16 marcadores polimórficos, o número de alelos variou entre dois (SadH19) e 13 (SadH13), com uma média igual a sete alelos por loco. Os valores das médias da heterozigosidade observada (Ho) e esperada (He) e do PIC foram iguais a 0,506, 0,543, 0,635 respectivamente. A proporção da diversidade máxima encontrada foi de 65%, o que indica valores de diversidade genética que podem ser considerados medianos para esse conjunto de locos avaliados em três populações de S. adstringens. Por outro lado, embora a diversidade genética seja mediana, esse conjunto de 16 marcadores polimórficos exibiu uma probabilidade de exclusão de paternidade combinada alta (0,999983) e uma probabilidade de identidade combinada baixa (3,49x10-15). A análise de variância das frequências alélicas apresentou valores significativos para duas das três estatísticas estimadas com f não significativo 0,050, θ significativo igual a 0,329 e F no valor global também significativo 0,360. Assim, pode-se concluir que o painel de marcadores polimórficos desenvolvidos para S. adstringens é altamente informativo e indicado para estudos genéticos populacionais para a espécie. Outro fator importante é que esses marcadores podem ser testados em outras espécies próximas evolutivamente para possível disponibilização de marcadores microssatélites, sem a necessidade de desenvolvimento de novos primers.eng
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESeng
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationBARATELI, L. O. Desenvolvimento de marcadores microssatélites para Stryphnodendron adstringens (barbatimão - Fabaceae). 2018. 59 f. Dissertação (Mestrado em Genética e Melhoramento de Plantas) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2018.eng
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/9034
dc.languageporeng
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáseng
dc.publisher.countryBrasileng
dc.publisher.departmentEscola de Agronomia - EA (RG)eng
dc.publisher.initialsUFGeng
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Genética e Melhoramento de Plantas (EA)eng
dc.rightsAcesso Aberto
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectBarbatimãopor
dc.subjectCerradopor
dc.subjectPlanta medicinalpor
dc.subjectSSRpor
dc.subjectMedicinal planteng
dc.subject.cnpqCIENCIAS AGRARIAS::AGRONOMIAeng
dc.titleDesenvolvimento de marcadores microssatélites para Stryphnodendron adstringens (barbatimão - Fabaceae)eng
dc.title.alternativeDevelopment of microssatellite markers for Stryphnodendron adstringens (barbatimão - Fabaceae)eng
dc.typeDissertaçãoeng

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