Identificação de punicalagina das folhas de Lafoensia pacari (Lythraceae) e avaliação das atividades biológicas

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dc.contributor.advisor-co1Santos, Suzana da Costa
dc.contributor.advisor-co1Latteshttp://lattes.cnpq.br/7811945085200334eng
dc.contributor.advisor1Bara, Maria Teresa Freitas
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/3914164125498267eng
dc.contributor.referee1Bara, Maria Teresa Freitas
dc.contributor.referee2Paula, Joelma Abdaia Marciano de
dc.contributor.referee3Bozinis, Marize Campos Valadares
dc.creatorChaibub, Beatriz Abdallah
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/3552461326425875eng
dc.date.accessioned2019-07-17T13:55:32Z
dc.date.issued2013-08-30
dc.description.abstractLafoensia pacari (Lythraceae) is a native plant of the Brazilian cerrado know as pacari. Studies showed anti-inflammatory, anti-oxidant e antinociceptive activities. This work aimed to isolate and identify chemical compounds and biological activities as anti-inflammatory, antiulcer, antissecretory, angiogenic and healing of the extract of the leaves and of an isolated from L. pacari. Initially we prepared and characterized the plant drug and was obtained the crude extract of pacari (EBP) in acetone 50% v/v. The extract was characterized and lyophilized for user in testing of biological activities. Then we did the fractionation of EBP with ethyl acetate and methanol. Chromatography of the fraction soluble in methanol was performed on a column of Diaion ® HP-20 and was monitored the chromatographic profile by thin layer chromatography. After collecting the fractions, we evaluated the chromatographic profile by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) and the isolated compound was analyzed by nuclear magnetic resonance (NMR), obtaining one-dimensional and two-dimensional spectra. It was validated a HPLC method for quantification of punicalagin according to parameters of the National Agency for Sanitary Vigilance. The biological activities evaluated for EBP lyophilized and punicalagin followed the experimental models: anti-inflammatory activity in the croton oil-induced ear edema assay (EBP 5 mg / ear), antiulcer activity of gastric lesions induced by indomethacin (EBP 150 mg / kg and punicalagin 120 mg / kg), evaluation of antisecretory activity gastric acid in pylorus-ligation model (EBP 75, 150, 300 mg / kg and punicalagin 120 mg / kg), angiogenic activity in the chorioallantoic membrane model (CAM) (EBP 10 %) and the wound healing activity of cutaneous wound model in rats (EBP 10%). During the characterization of plant drug and EBP, we could confirm the presence of tannins. The yield of lyophilized EBP was 37.6%. In the HPLC analysis verified the presence of two peaks in the majority EBP, indicated that they are the same compound after the analysis of its UV absorption spectrum. After column chromatography and monitoring of the chromatographic profile, the fractions obtained were collected in 12 fractions (PAC) and observed that the PAC 2-7 showed the same chromatographic profile, and the total yield of 67.23%. The PAC 6 was analyzed for its one and two-dimensional NMR experiments, which allowed the structural elucidation of punicalagin, a hydrolysable tannin of the ellagitannins class. The validated method for punicalagin proved to be selective, linear, precise, accurate and robust. The content of punicalagin quantified in EBP was 65%. The EBP (5 mg / ear) showed anti-inflammatory activity by reducing edema of ear (41.44%, p < 0.001). The EBP at a dose of 150 mg / kg and punicalagin at a dose of 120 mg / kg reduced the rate of gastric damage following indomethacin administration of 29,82 (p ≤ 0.05) and 52.03% (p ≤ 0.001), respectively. In the evaluation of the parameters of acid secretion, the EBP and punicalagin were able to significantly reduce the volume (9.64%, p ≤ 0.05; 11.24 %, p ≤ 0.05, 15.66%, p ≤ 0.001) for EBP in the respective doses of 75, 150, 300 mg / kg and in punicalagin 9.69%, p ≤ 0.05 (to 120 mg / kg) a free acidity (76.89%, p ≤ 0.01, 58.97%, p ≤ 0.01, 49.66%, p ≤ 0.001) for EBP in the repective doses of 75, 150, 300 mg/kg and punicalagina at 22.47%, p ≤ 0.05 (for the 120 mg / kg) and total acidity (65.30%, p ≤ 0.001, 71.46%, p ≤ 0.001; 69.40, p ≤ 0.001) to EBP in the respective doses of 75, 150, 300 mg/kg and in punicalagin 41.98%, p ≤ 0.01 (to 120 mg / kg) acid secretion in mice 4 hours after pyloric ligation. The EBP 10% showed angiogenic property in the MCA model, decreased time to healing of wounds in rats and significantly increased two parameters involved in wound healing, the number of vessels and collagen production. This is the first study of the leaves of L. pacari demonstrating the presence of punicalagin and anti-inflammatory, antiulcer, antissecretory, angiogenesis activities and decreased healing time of EPB and punicalagin.eng
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dc.description.resumoLafoensia pacari (Lythraceae) é uma planta do Cerrado Brasileiro conhecida como pacari. Estudos mostraram as atividades anti-inflamatória, antioxidante e antinociceptiva. Este trabalho objetivou isolar e identificar constituintes químicos e avaliar as atividades biológicas anti-inflamatória, antiulcerogênica, antissecretora, angiogênica e cicatrizante do extrato das folhas e do composto isolado de L. pacari. Iniciou-se pela caracterização da droga vegetal e obtenção do extrato bruto de pacari (EBP) em acetona 50% v/v. O extrato foi caracterizado e liofilizado para utilização nos testes de atividades biológicas. Seguiu-se para o fracionamento do EBP com acetato de etila e metanol. Foi realizada cromatografia em coluna de Diaion® HP-20 da fração solúvel em metanol e foi monitorado o perfil em cromatografia em camada delgada. Após as frações serem reunidas, avaliou-se o perfil cromatográfico por Cromatografia em Fase Líquida de Alta Eficiência (CLAE) e o composto isolado foi analisado por Ressonância Magnética Nuclear (RMN), sendo obtidos os espectros unidimensional e bidimensional. Validou-se um método em CLAE para quantificação de punicalagina de acordo com os parâmetros da Agência Nacional de Vigilância Sanitária. As atividades biológicas avaliadas para EBP liofilizado e punicalagina seguiram os modelos experimentais: atividade anti-inflamatória por edema de orelha induzido por óleo de cróton (EBP 5 mg/orelha), atividade antiulcerogênica por lesões gástricas induzidas por indometacina (EBP 150 mg/kg e punicalagina 120 mg/kg), avaliação de atividade antissecretora ácida gástrica em modelo de ligadura pilórica (EBP 75, 150, 300 mg/kg e punicalagina 120 mg/kg), atividade angiogênica no modelo da membrana corioalantoide (MCA) (EBP a 10%) e atividade cicatrizante pelo modelo das feridas cutâneas em ratos (EBP a 10%). Durante a caracterização da droga vegetal e do EBP, pode-se constatar a presença de taninos. O rendimento do EBP liofilizado foi de 37,6%. Na análise por CLAE verificou-se a presença de 2 picos majoritários no EBP, que indicou serem de um mesmo composto após a análise de seu espectro de absorção em UV. Após a cromatografia em coluna e monitoramento do perfil cromatográfico, as frações obtidas foram reunidas em 12 novas frações (PAC) e observou-se que PAC 2 a 7 apresentaram o mesmo perfil cromatografico, sendo o rendimento total de 67,23%. A PAC 6 foi analisada por RMN uni e bidimensionais, o que possibilitou a elucidação estrutural de punicalagina, um tanino hidrolisável da classe dos elagitaninos. O método validado para punicalagina provou ser seletivo, linear, preciso, exato e robusto. O teor de punicalagina quantificado em EBP foi de 65%. O EBP (5 mg/orelha) apresentou atividade anti-inflamatória por redução do edema de orelha em (41,44%, p < 0,001).O EBP na dose de 150 mg/kg e punicalagina na dose de 120 mg/kg reduziram o índice de lesão gástrica após administração da indometacina em 29,82 (p ≤ 0,05) e 52,03% (p ≤ 0,001) respectivamente. Na avaliação dos parâmetros de secreção ácida, o EBP e a punicalagina foram capazes de reduzirem significativamente o volume (9,64%, p ≤ 0,05; 11,24%, p ≤ 0,05; 15,66%, p ≤ 0,001) para EBP nas respectivas doses de 75, 150, 300 mg/kg e punicalagina em 9,69%, p ≤ 0,05 (para a dose de 120 mg/kg), a acidez livre (76,89%, p ≤ 0,01; 58,97%, p ≤ 0,01; 49,66%, p ≤ 0,001) para EBP nas respectivas doses de 75, 150, 300 mg/kg e punicalagina em 22,47%, p ≤ 0,05 (para a dose de 120 mg/kg) e a acidez total (65,30%, p ≤ 0,001; 71,46%, p ≤ 0,001; 69,40, p ≤ 0,001) para EBP nas respectivas doses de 75, 150, 300 mg/kg e punicalagina em 41,98%, p ≤ 0,01 (para dose de 120 mg/kg) da secreção ácida de camundongos após 4 horas de ligadura pilórica. O EBP a 10% apresentou propriedade angiogênica no modelo da MCA, diminuiu o tempo de cicatrização das feridas em ratos e aumentou significativamente dois parâmetros envolvidos na cicatrização, o número de vasos e a produção de colágeno. Esse é o primeiro estudo com as folhas do L. pacari demonstrando a presença de punicalagina e as atividades anti-inflamatória, antiulcerogênica, antissecretória, angiogênica e de diminuição do tempo de cicatrização do EPB e punicalagina.eng
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationCHAIBUB, Beatriz Abdallah. Identificação de punicalagina das folhas de Lafoensia pacari (Lythraceae) e avaliação das atividades biológicas. 2013. 113 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Farmacêuticas) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2013.eng
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/9842
dc.languageporeng
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáseng
dc.publisher.countryBrasileng
dc.publisher.departmentFaculdade Farmácia - FF (RG)eng
dc.publisher.initialsUFGeng
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Ciências Farmacêuticas (FF)eng
dc.rightsAcesso Aberto
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectPlanta medicinalpor
dc.subjectPacaripor
dc.subjectElagitaninospor
dc.subjectAnti-inflamatóriapor
dc.subjectAntiúlcerogênicapor
dc.subjectAntissecretorapor
dc.subjectMedicinal planteng
dc.subjectEllagitanninseng
dc.subjectAnti-inflammatoryeng
dc.subjectAntiulcereng
dc.subjectAntisecretoryeng
dc.subject.cnpqFARMACIA::ANALISE E CONTROLE E MEDICAMENTOSeng
dc.titleIdentificação de punicalagina das folhas de Lafoensia pacari (Lythraceae) e avaliação das atividades biológicaseng
dc.title.alternativeIdentification of punicalagin from leaves of Lafoensia pacari (Lythraceae) and evaluation of biological activitieseng
dc.typeDissertaçãoeng

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