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Tipo do documento: Artigo
Título: Aislamiento, viabilidad y rendimiento de células mononucleares de médula ósea de conejos
Título(s) alternativo(s): Isolation, viability and yield of rabbits’ bone marrow mononuclear cells
Autor: Oliveira, Benito Juarez Nunes Alves de
Souza, Luiz Augusto de
Eurides, Duvaldo
Silva, Luiz Antônio Franco da
Baungarten, Letícia Binda
Busnardo, Camila Araújo
Resumo: El objetivo de este estudio fue establecer un protocolo de aislamiento celular y evaluar el rendimiento y la viabilidad de células mononucleares de la médula ósea de conejos. Fueron usados 32 conejos adultos, machos, de la raza Nueva Zelanda, con peso medio de 3,06±0,24 kg. Se aspiró un volumen de 2,0 mL de la médula ósea del húmero en cada animal. Las muestras fueron diluidas en solución salina tamponada de Dulbecco (DPBS) y sometidas al gradiente de densidad Ficoll-Ipaque (1,077 g/mL) en proporción 2:1. En seguida, el material fue centrifugado a 495g por 30 minutos a 15 oC. El rendimiento y la viabilidad fueron determinados por lectura en una cámara hemocitométrica de Neubauer, utilizando el colorante de exclusión vital azul de tripan. Se obtuvo un rendimiento medio [±DE] de 6,65 [±4,18] x106 células/ mL y una viabilidad media [±DE] de 92,66 [±4,35] %. El protocolo que utilizó el gradiente de densidad fue efectivo para el aislamiento, rendimiento y viabilidad de células mononucleares de la médula ósea de conejos para posterior utilización en terapia celular.
Abstract: The aim of this study was to establish a cellular isolation protocol and evaluate the yield and viability of bone marrow mononuclear cells in rabbits. Thirty-two male adult New Zealand rabbits were used with 3.06 ± 0.24 Kg mean weight. A volume of 2.0 mL bone marrow was aspirated from the humerus of each animal. Samples were diluted in Dulbecco phosphate buffered saline (DPBS) and submitted to density gradient using Ficoll-Ipaque (1.077 g/mL) at a 2:1 rate. Subsequently, the material was centrifuged at 495g during 30 minutes, at 15 oC. The yield and cell viability were determined in Neubauer haemocytometer chamber, using trypan blue vital staining. A mean yield [±SD] of 6.65 [±4.18] x106 cells/mL was obtained and the mean viability [±SD] was 92.66 [±4.35] %. The protocol using density gradient was effective for the isolation, yield and viability of bone marrow mononuclear cells in rabbits in order to use them in cell therapy.
Palavras-chave: Células madre mesenquimales
Médula ósea
Aislamiento
Conejos
Mesenchymal stem cells
Bone marrow
Isolation
Rabbits
País: Argentina
Unidade acadêmica: Escola de Veterinária e Zootecnia - EVZ (RG)
Citação: OLIVEIRA, Benito Juarez Nunes Alves de; SOUZA, Luiz Augusto de; EURIDES, Duvaldo; SILVA, Luiz Antônio Franco da; BAUNGARTEN, Letícia Binda; BUSNARDO, Camila Araújo. Aislamiento, viabilidad y rendimiento de células mononucleares de médula ósea de conejos. Acta Bioquímica Clínica Latinoamericana, La Plata, v. 45, n. 1, p. 113-118, 2011.
Tipo de acesso: Acesso Aberto
URI: http://repositorio.bc.ufg.br/handle/ri/13481
Data de publicação: 2011
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