Desenvolvimento de metodologia para avaliação de ácidos graxos em amostras de sêmen humano para fins de estudo de fertilidade

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dc.contributor.advisor1Chaves, Andrea Rodrigues
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/6064014965252121pt_BR
dc.contributor.referee1Chaves, Andrea Rodrigues
dc.contributor.referee2Sorgi, Carlos Arterio
dc.contributor.referee3Antoniosi Filho, Nelson Roberto
dc.creatorBueno, Amanda Cardoso
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/8521690266262805pt_BR
dc.date.accessioned2022-03-24T12:26:51Z
dc.date.available2022-03-24T12:26:51Z
dc.date.issued2022-02-22
dc.description.abstractInfertility has been the subject of studies by several researchers around the world, in this field, the influence of diet has been one of the factors evaluated. In women, the cell responsible for reproduction is the egg, for men, it is the sperm, present in human semen, which is a complex matrix, which contains proteins, amino acids, lipids, among other compounds. A semen, with desirable qualities, needs to demonstrate good concentration, morphology, vitality and motility of the sperm present. The lipids present in the composition, especially the fatty acids, such as omegas 3, 6 and 9, help in the structuring of cell membranes, making them more resistant, also acting in the improvement of motility. Thus, in partnership with the Department of Biomedicine of the Federal University of Jataí (UFJ), under number 3,792,715 of the ethics committee of the Federal University of Goiás (UFG), this work proposes to evaluate possible relationships between seminal quality and ingestion of baru nut, typical food of the cerrado region of Goiás. For analytical purposes, the Mass Spectrometry (MS) technique was used, this is a technique subject to the presence of endogenous compounds of the complex matrix, such as semen. Therefore, the sample preparation step for analysis is extremely important. The miniaturized sample preparation technique, disposable pippete extraction (DPX), was evaluated in terms of cleaning the sample and extracting the analytes of interest. In order to increase the selectivity of the technique, a DPX extractor phase, developed by our research group, was applied to extract fatty acids from human semen, followed by analysis by direct infusion in the mass spectrometer. The parameters with direct influence on the efficiency of the DPX technique were optimized. The results showed greater extraction efficiency for 700 μL of semen sample aspirated/dispensed for 7 cycles, followed by desorption, using 1000 μL of acetonitrile in just 1 cycle. For comparison purposes, the samples were also analyzed with sample preparation performed by the adapted Bligh & Dyer method, followed by direct infusion in high resolution mass spectrometry. The method developed was submitted to the evaluation of selectivity, matrix effect, calibration curve, precision and accuracy, following the current legislation for bioassays, RDC 27/2012, drafted and supervised by the National Health Surveillance Agency (ANVISA).eng
dc.description.provenanceSubmitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2022-03-23T13:29:50Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Amanda Cardoso Bueno - 2022.pdf: 1365252 bytes, checksum: ba29119b374b804afd87b71da1df0e77 (MD5) license_rdf: 805 bytes, checksum: 4460e5956bc1d1639be9ae6146a50347 (MD5)en
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dc.description.resumoA infertilidade vem sendo assunto de estudos de vários pesquisadores ao redor do mundo, nesse campo, a influência da dieta tem sido um dos fatores avaliados. Nas mulheres, a célula responsável pela reprodução é o óvulo, já para os homens, é o espermatozoide, presente no sêmen humano, que é uma matriz complexa, a qual contém proteínas, aminoácidos, lipídios, dentre outros compostos. Um sêmen, com qualidades desejáveis, precisa demonstrar boa concentração, morfologia, vitalidade e motilidade dos espermatozoides presentes. Os lipídios presentes na composição, em especial os ácidos graxos, como os ômegas 3, 6 e 9, auxiliam na estruturação das membranas das células, tornando-os mais resistentes, atuando também na melhora da motilidade. Dessa forma, em parceria com o departamento de Biomedicina da Universidade Federal de Jataí (UFJ), sob o número 3.792.715 do comitê de ética da Universidade Federal de Goiás (UFG), este trabalho propõe avaliar possíveis relações entre a qualidade seminal e a ingestão da castanha de baru, alimento típico da região do cerrado goiano. Para fins analíticos, foi utilizada a técnica de espectrometria de massas (do inglês Mass Spectrometry - MS), esta é uma técnica sujeita à presença dos compostos endógenos da matriz complexa, como o sêmen. Sendo assim, a etapa de preparo de amostras para as análises é de extrema importância. A técnica miniaturizada de preparo de amostras, extração sortiva em ponteiras descartáveis (do inglês disposable pippete extraction – DPX), foi avaliada frente à limpeza da amostra e da extração dos analitos de interesse. Com o intuito de aumentar a seletividade da técnica, uma fase extratora DPX, desenvolvida pelo nosso grupo de pesquisa, foi aplicada na extração de ácidos graxos em sêmen humano, seguida de análises por infusão direta no espectrômetro de massas. Os parâmetros com influência direta na eficiência da técnica DPX foram otimizados. Os resultados apontaram maior eficiência de extração para 700 μL de amostra de sêmen aspirada/ dispensada por 7 ciclos, seguida de dessorção, utilizando 1000 μL de acetonitrila em apenas 1 ciclo. Para fins de comparação, as amostras também foram analisadas com o preparo de amostra realizado pelo método Bligh & Dyer adaptado, seguido pela infusão direta em espectrometria de massas de alta resolução. O método desenvolvido foi submetido à avaliação de seletividade, efeito matriz, curva de calibração, precisão e exatidão, seguindo a legislação vigente para bioensaios, a RDC 27/2012, redigida e fiscalizada pela Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA).pt_BR
dc.identifier.citationBUENO, A. C. Desenvolvimento de metodologia para avaliação de ácidos graxos em amostras de sêmen humano para fins de estudo de fertilidade. 2022. 72 f. Dissertação (Mestrado em Química) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2022.pt_BR
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/11965
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáspt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentInstituto de Química - IQ (RG)pt_BR
dc.publisher.initialsUFGpt_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Química (IQ)pt_BR
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/*
dc.subjectÁcidos graxospor
dc.subjectSêmen humanopor
dc.subjectExtração sortiva em ponteiras descartáveispor
dc.subjectFertilidadepor
dc.subjectEspectrometria de massaspor
dc.subjectFatty acidseng
dc.subjectHuman semeneng
dc.subjectDisposable pipette extractioneng
dc.subjectFertilityeng
dc.subjectMass spectrometryeng
dc.subject.cnpqCIENCIAS EXATAS E DA TERRA::QUIMICApt_BR
dc.titleDesenvolvimento de metodologia para avaliação de ácidos graxos em amostras de sêmen humano para fins de estudo de fertilidadept_BR
dc.title.alternativeDevelopment of a methodology for evaluation of fatty acids in human semen samples for fertility study purposeseng
dc.typeDissertaçãopt_BR

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