Análise proteômica do fungo Paracoccidioides brasiliensis sob privação de cobre

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dc.contributor.advisor1Soares, Célia Maria de Almeida
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/8539946335852637pt_BR
dc.contributor.referee1Soares, Célia Maria de Almeida
dc.contributor.referee2Castro, Agenor de
dc.contributor.referee3Silva, Lívia do Carmo
dc.contributor.referee4Curcio, Juliana Santana de
dc.contributor.referee5Silva, Kleber Santiago Freitas e
dc.creatorPetito, Guilherme
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/9484967397025799pt_BR
dc.date.accessioned2020-09-10T15:39:26Z
dc.date.available2020-09-10T15:39:26Z
dc.date.issued2020-04-27
dc.description.abstractCopper is an important micronutrient that acts as a cofactor in important enzymes that participate in processes of obtaining energy, reducing reactive oxygen species and metal uptake such as iron. Studies with different pathogenic fungi demonstrate the importance of an efficient copper homeostasis system, as well as the impact of this metal deprivation on the metabolism of these organisms. However, little is known about the impact of copper deprivation on pathogenic fungi of the genus Paracoccidioides. Thus, the objective of this study was to analyze the proteomic behavior of the fungus Paracoccidioides brasiliensis during copper deprivation, identifying metabolic changes in face of this condition. Proteomic analysis was performed using mass spectrometry and labelling the samples with iTRAQ (Isobariq tag for relative and absolute quantitation). In addition, methodologies such as qRT-PCR, fluorescence microscopy, enzymatic activities and Western bloting were applied in this study in order to support the proteomic data analyzed. We identified 183 differentially expressed proteins. Proteins related to gluconeogenesis, beta-oxidation and cell wall remodeling were up-regulated. We identified decreased expression of an important detoxification enzyme, Cu / Zn dependent Superoxide Dismutase (Sod1p). On the other hand, the enzymes Thioredoxin (Trxp), Glutathione S-transferase (GST) and Mn / Fedependent superoxide dismutase (Sod2p) were up-regulated. Also, NADPH production-related to the pentose-phosphate pathway enzymes. detoxifying enzyme reducing agent. An alternative oxidase (Aoxp) was up-regulated, while enzyme activity tests showed that the activity of the enzyme Cytochrome c oxidase (Coxp) was decreased. An iron uptake-related copper chaperone, Atx1 and described as important in response to oxidative stress, was up-regulated. We propose here an overview that presents the main metabolic changes in P. brasiliensis under copper deprivation and that include changes in the energy acquisition process, carbon metabolism flow, wall modeling, detoxification and respiration processes.eng
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dc.description.resumoO cobre é um importante micronutriente que atua como cofator em enzimas que participam em processos de obtenção de energia, redução de espécies reativas de oxigênio e captação de metal, como o ferro. Estudos com diferentes fungos patogênicos demonstram a importância de um sistema eficiente de homeostase de cobre, bem como o impacto da privação desse metal no metabolismo desses organismos. Entretanto, pouco se sabe acerca do impacto da privação de cobre em fungos patogênicos do gênero Paracoccidioides. Dessa forma, objetivou-se com este estudo analisar o comportamento proteômico do fungo Paracoccidioides brasiliensis durante a privação de cobre, identificando as alterações metabólicas frente a essa condição. A análise proteômicas foi realizada utilizando espectrometria de massas e marcação das amostras com iTRAQ (Isobariq tag for relative and absolute quantitation). Além disso, foram aplicadas neste estudo metodologias como qRTPCR, microscopia de fluorescência, atividades enzimáticas e Western bloting, com intuito de validar os dados proteômicos analisados. Foram identificadas 183 proteínas diferencialmente expressas. Proteínas relacionadas à gliconeogênese, beta-oxidação e remodelamento de parede estavam com expressão aumentada na condição de privação de cobre. Identificamos diminuição na expressão de uma importante enzima de detoxificação, a superóxido dismutase Cu/Zn dependente (Sod1p). Por outro lado, as enzimas tioredoxina (Trxp), glutationa-S-transferase (GST) e superóxido dismutase Mn/Fe dependente (Sod2p) estavam up-reguladas. Também enzimas da via das pentoses-fosfato relacionadas à produção de NADPH, importante agente redudor de enzimas de detoxificação foram aumentadas. Uma oxidase alternativa (Aoxp) estava com expressão aumentada, enquanto testes de atividades enzimáticas demonstraram que a atividade da enzima citocromo c oxidase (Coxp) estava diminuída. A expressão chaperona de cobre, Atx1, relacionada com captação de ferro e descrita como importante em reposta ao estresse oxidativo, estava aumentada. Propomos aqui uma visão geral que apresenta as principais mudanças metabólicas em P. brasiliensis sob privação de cobre, que incluem mudanças no processo de obtenção de energia, no fluxo do metabolismo de carbono, no remodelamento de parede, nos processos de detoxificação e de respiração.pt_BR
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiáspt_BR
dc.identifier.citationPETITO, G. Análise proteômica do fungo Paracoccidioides brasiliensis sob privação de cobre. 2020.85 f. Tese (Doutorado em Genética e Biologia Molecular) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2020.pt_BR
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/10648
dc.languageporpt_BR
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáspt_BR
dc.publisher.countryBrasilpt_BR
dc.publisher.departmentInstituto de Ciências Biológicas - ICB (RG)pt_BR
dc.publisher.initialsUFGpt_BR
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Genética e Biologia Molecular (ICB)pt_BR
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil*
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/*
dc.subjectParacoccidioides spp.por
dc.subjectProteomicapor
dc.subjectiTRAQpor
dc.subjectParacoccidiodomicosepor
dc.subjectProteomiceng
dc.subjectParacoccidioidomycosiseng
dc.subject.cnpqCIENCIAS BIOLOGICASpt_BR
dc.titleAnálise proteômica do fungo Paracoccidioides brasiliensis sob privação de cobrept_BR
dc.title.alternativeProteomic analysis of the fungus Paracoccidioides brasiliensis under copper deprivationeng
dc.typeTesept_BR

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