Desenvolvimento de teste rápido para detecção de Listeria monocytogenes em alimentos

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dc.contributor.advisor-co1Kipnis, André
dc.contributor.advisor-co1Latteshttp://lattes.cnpq.br/4434965360286741eng
dc.contributor.advisor1Bührer, Samira
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/6715236625981869eng
dc.contributor.referee1Bührer, Samira
dc.contributor.referee2Souza, Guilherme Rocha Lino de
dc.contributor.referee3Moura, Rodrigo Scaliante de
dc.contributor.referee4André, Maria Cláudia Dantas Porfírio Borges
dc.contributor.referee5Pinto, Emerith Mayra Hungria
dc.creatorSilva Filho, Ernandes da
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/6916329695347417eng
dc.date.accessioned2018-04-09T14:43:42Z
dc.date.issued2018-02-27
dc.description.abstractListeriosis is a bacterial infection caused by Listeria monocytogenes, a bacterium transmitted mainly by the ingestion of contaminated food. It is the main responsible for food infections with low morbidity rate, but when contamination occurs in immunosuppressed the mortality rates are high, representing an important public health problem. Methods available for identification of the presence of Listeria monocytogenes include isolation of the bacterium through conventional culture, laborious, time-consuming and low sensitivity method, and usually complex and costly molecular and / or immunological methods requiring trained personnel and equipment. Therefore, the search for rapid, sensitive and specific methods for detecting the presence of Listeria monocytogenes in foods is useful and necessary for infection prevention and great value to reduce the mortality rate in the immunocompromised as well as to enable the epidemiological surveillance of this disease. The objectives of the study were: To develop lateral flow immunochromatographic test for the identification of L. monocytogenes in foods; To evaluate the performance of the lateral flow immunochromatographic test using food samples naturally and artificially contaminated with L. monocytogenes. As the detection agent, were impregnated glass fiber with anti-internalin-A MAb-2D12 conjugated to colloidal gold. As a capture agent, were sensitized, on nitrocellulose paper, the test line with polyclonal anti-internalin-B antibody, and in the control line with protein A, to validate the activity of the detection agent. Inoculations of standard strains of Listeria monocytogenes were used for evaluation of the Listeria detection in the proposed test. As a negative control, we used strains of Listeria innocua, Enterobacter sp. and Bacillus cereus. Positivity was obtained in prototypes of rapid tests sensitized with Polyclonal Anti-InlB. Positivity was observed in samples containing culture medium and newly cultured bacteria, validating the methodology used in the development of the test. The detection capacity of the test at D concentration is 2x10 4 CFU / mL.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-04-09T14:13:14Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ernandes da Silva Filho - 2018.pdf: 2121110 bytes, checksum: 70fe1857112c1027e6cf53a16c1af017 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)eng
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dc.description.resumoA listeriose é uma infecção bacteriana, provocada por Listeria monocytogenes, uma bactéria transmitida principalmente pela ingestão de alimentos contaminados. É o principal agente responsável pelas infecções alimentares com baixa taxa de morbidade, porém quando a infecção ocorre em imunodeprimidos os índices de mortalidade são elevados, representando um importante problema de saúde pública. Os métodos disponíveis para a identificação da presença de Listeria monocytogenes incluem o isolamento da bactéria através de cultivo convencional, que consiste em um método laborioso, demorado e de baixa sensibilidade e métodos moleculares e/ou imunológicos, normalmente complexos, de custo elevado, requerendo equipamentos e pessoal treinado. Portanto, a busca por métodos alternativos, rápidos, sensíveis e específicos para a detecção da presença de Listeria monocytogenes em alimentos, é útil e necessária para prevenção da infecção e de grande valia para reduzir a taxa de mortalidade nos imunodeprimidos, bem como, viabilizar a vigilância epidemiológica desta enfermidade. Os objetivos do trabalho foram: Desenvolver teste imunocromatográfico de fluxo lateral para identificação de L. monocytogenes em alimentos; Avaliar o desempenho do teste imunocromatográfico de fluxo lateral utilizando amostras de alimentos naturalmente e artificialmente contaminados com L. monocytogenes. Como agente de detecção, foi impregnado à fibra de vidro o monoclonal MAb-2D12 anti-internalina-A conjugado ao ouro coloidal. Como agente de captura, foi sensibilizado, em papel de nitrocelulose, a linha teste com anticorpo policlonal anti-internalina-B, e na linha controle com proteína A, para validar a atividade do agente de detecção. Inóculos de cepas padrões de Listeria monocytogenes foram utilizados para avaliação da detecção Listeria no teste proposto. Como controle negativo, utilizamos cepas de Listeria innocua, Enterobacter sp. e Bacillus cereus. Foi obtido positividade em protótipos de testes rápidos sensibilizados com policlonal anti-InlB. Observou-se positividade em amostras contendo meio de cultura e a bactéria recém cultivada, validando a metodologia empregada no desenvolvimento do teste. A capacidade de detecção do teste foi de 2x10 4 UFC/mL.eng
dc.description.sponsorshipConselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqeng
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationSILVA FILHO, E. Desenvolvimento de teste rápido para detecção de Listeria monocytogenes em alimentos. 2018. 99 f. Dissertação (Mestrado em Medicina Tropical e Saúde Publica) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2018.eng
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/8319
dc.languageporeng
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáseng
dc.publisher.countryBrasileng
dc.publisher.departmentInstituto de Patologia Tropical e Saúde Pública - IPTSP (RG)eng
dc.publisher.initialsUFGeng
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Medicina Tropical e Saúde Publica (IPTSP)eng
dc.rightsAcesso Aberto
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectListeriapor
dc.subjectImunocromatografiapor
dc.subjectAlimentospor
dc.subjectImunocromatographyeng
dc.subjectFoodeng
dc.subjectListeriaeng
dc.subject.cnpqCLINICA MEDICA::ALERGOLOGIA E IMUNOLOGIA CLINICAeng
dc.titleDesenvolvimento de teste rápido para detecção de Listeria monocytogenes em alimentoseng
dc.title.alternativeRapid test development for detection of Listeria monocytogenes in foodeng
dc.typeDissertaçãoeng

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