Polimorfismo e expressão de genes de celulose sintase em eucalyptus

dc.contributor.advisor1Coelho, Alexandre Siqueira Guedes
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/0840926305216925por
dc.creatorTrigueiro, Elaine Lima
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/5931630260544684por
dc.date.accessioned2014-08-06T15:10:39Z
dc.date.issued2007
dc.description.abstractCellulose is one of the most important and the most abundant biopolymer on the planet, playing a key role on the evolutionary history of plants. Important advances have been made in recent years, in particular on the identification of genes and co- expressed genes for the formation of cellulose in the primary and secondary cellular walls of plants. In addition to its biological relevance, cellulose has a great economic importance, not only in Brazil but in the world, especially due to the production of cellulose and paper from Eucalyptus. The high levels of production and competition in the international market are guaranteed by great investments, which are carried through by the forestal sector, in particular by the Genolyptus Project – Brazilian Network for Research on Eucalyptus Genome. This project is the result of a collective effort of companies involved on the production of cellulose and paper and various public research institutions. Their main goal is to identify and characterize genes involved in wood formation with the intent to genetically improve Eucalyptus. Based on this goal, this work was developed with two objectives. The first is doing a preliminary characterization of the cellulose synthase gene in Eucalyptus, which is associated with the synthesis of the secondary cellular wall and is orthologous to the gene EgCeA2, of E. grandis. The second objective is to study the linkage disequilibrium in another gene of cellulose synthase, orthologous to the EgCesA3 gene, sampled from a wild population of E. urophylla. Regarding the CesA2 gene, an exonic region with 427bp was sequenced from DNA samples of 12 individuals from different species and geographic regions. The next step was to proceed with an analysis to detect polymorphism which gave an estimate of three SNPs synonymous along the contig, with an estimated π = 0.00212 diversity index. A clone containing the CesA2 gene was identified through a selection from a BAC library generated in the scope of the Genolyptus Project. This clone gives the prospect for the development of a minute characterization of this gene structure in Eucalyptus. Additionally, concerning the CesA3 gene, the sequencing of 32 individuals allowed for the formation of a 770bp contig with a π = 0.00185 diversity index and detection of nine polymorphic loci distributed in intron and exon regions and at the 3’-UTR of the gene. The analysis of the extension of linkage disequilibrium in the CesA3 gene suggests that SNPs tend to be in strong linkage disequilibrium at a distance of approximately 600bp. The knowledge of the position of the SNPs in the genes CesA2 and CesA3 makes possible the use of these markers in future studies of genetic mapping. The lack of non-synonymous SNPs in exon regions ensures that cellulose is in fact a very important polymer for plant survival. Hence its synthesis machinery presents highly conserved characteristics and so mutations in regions with effective transcription tend mostly to be deleterious and therefore would not be fixed. Moreover, the analysis of CesA gene expression in different species of Eucalyptus, was made from two boardings: “Digital Differential Display”, from different libraries of ESTs and microarrays, optimized in the scope of the Genolyptus project. The analysis with data of microarrays showed less sensible in the detention of the distinguishing expression, probably had to the calls “crossed relations”.eng
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dc.description.resumoA celulose é um dos biopolímeros mais importantes do planeta, sendo também o mais abundante, e sem dúvida uma característica chave na história evolutiva das plantas. Contudo, sua biossíntese e regulação ainda não são bem compreendidas, embora avanços importantes tenham ocorrido nos últimos anos, sobretudo na identificação de genes e grupos de genes co-expressos para a formação de celulose na parede celular primária e secundária de vegetais. Além de sua relevância biológica, a celulose possui uma grande importância econômica no Brasil e no mundo, com destaque para a produção de celulose e papel a partir de Eucalyptus. Para garantir os elevados níveis de produtividade e competitividade no mercado internacional, grandes investimentos têm sido realizados pelo setor florestal, destacando-se o Projeto Genolyptus – Rede Brasileira de Pesquisa do Genoma de Eucalyptus, fruto de um esforço de empresas do setor de produção de celulose e papel, e de diversas instituições públicas de pesquisa, que têm, dentre outros objetivos, o intuito de identificar e caracterizar genes envolvidos na formação da madeira, para, no futuro, usar essa informação no melhoramento genético do Eucalyptus. Nesse contexto, este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de realizar uma caracterização preliminar de um gene de celulose sintase em Eucalyptus, que está relacionado à síntese da parede celular secundária, sendo ortólogo ao gene EgCesA2, de E. grandis, bem como estudar o desequilíbrio de ligação em outro gene de celulose sintase, ortólogo ao gene EgCesA3, em uma amostra de uma população natural de E. urophylla. Em relação ao gene CesA2, foi seqüenciada uma região exônica do gene, formada por 427pb, a partir de amostras de DNA de 12 indivíduos de diferentes espécies e regiões geográficas. Procedeu-se a uma análise de detecção de polimorfismo, e estimou-se a ocorrência de três SNPs sinônimos ao longo do contig. Foi estimado um índice de diversidade π= 0,00212. Foi feita também uma triagem em uma biblioteca de BAC, gerada no âmbito do Projeto Genolyptus, e foi identificado o clone que contém o gene CesA2, o que permitirá o desenvolvimento futuro de caracterização minuciosa da estrutura deste gene em Eucalyptus. Em relação ao gene CesA3, a partir do seqüenciamento de 32 indivíduos, formou-se um contig de 770pb, e foi encontrado um índice de diversidade π= 0,00185. Foi possível a detecção de nove locos polimórficos distribuídos em regiões intrônicas, exônicas, e de 3’-UTR do gene. A análise de extensão do desequilíbrio de ligação dentro do gene CesA3 sugere que os SNPs tendem a se encontrar em forte desequilíbrio a uma distância de aproximadamente 600pb. O conhecimento da posição dos SNPs nos genes CesA2 e CesA3 viabiliza a utilização destas marcas em futuros estudos de mapeamento genético. A existência de SNPs sinônimos nas regiões exônicas seqüenciadas corrobora com a idéia de que a celulose é um polímero muito importante à sobrevivência da planta, e, portanto, sua maquinaria de síntese apresenta características bastante conservadas, de modo que mutações em regiões efetivamente transcritas tenderiam a ser deletérias e não seriam fixadas. Além disso, foi feita uma análise da expressão gênica dos genes CesA em diferentes espécies de Eucalyptus, a partir de duas abordagens: a “Digital Differential Display”, a partir de diferente bibliotecas de ESTs e os microarrays, otimizados no âmbito do projeto Genolyptus. A análise com dados de microarrays revelou-se menos sensível na detecção da expressão diferencial, provavelmente devido às chamadas “relações cruzadas”.por
dc.description.sponsorshipConselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqpor
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationTRIGUEIRO, Elaine Lima. Polimorfismo e expressão de genes de celulose sintase em Eucalyptus. 2007. 102 f. Dissertação (Mestrado em Agronomia) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2007.por
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tde/2892
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáspor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.departmentEscola de Agronomia e Engenharia de Alimentos - EAEA (RG)por
dc.publisher.initialsUFGpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Agronomia (EAEA)por
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dc.rightsAcesso abertopor
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectCelulosepor
dc.subjectSNPpor
dc.subjectBACpor
dc.subjectDesequilíbrio de ligaçãopor
dc.subjectCellulosepor
dc.subjectSNPpor
dc.subjectContigpor
dc.subjectBACpor
dc.subjectLinkage disequilibriumpor
dc.subject.cnpqCIENCIAS AGRARIAS::RECURSOS FLORESTAIS E ENGENHARIA FLORESTALpor
dc.thumbnail.urlhttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/retrieve/6063/Elaine%20Lima%20Trigueiro.pdf.jpg*
dc.titlePolimorfismo e expressão de genes de celulose sintase em eucalyptuspor
dc.title.alternativePolymorphism and expression of cellulose synthase genes in eucalyptuseng
dc.typeDissertaçãopor

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