Análise da herança do DNA do Trypanosoma cruzi em parentais e progênies de chagásicos de famílias de São Felipe – Bahia

dc.contributor.advisor-co1Cardoso, Clever Gomes
dc.contributor.advisor-co1Latteshttp://lattes.cnpq.br/9545455455623006eng
dc.contributor.advisor1Lacerda, Elisângela de Paula Silveira
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/9390789693192751eng
dc.contributor.referee1Teixeira, Antônio Raimundo Lima Cruz
dc.contributor.referee2Zapata, Marco Túlio Antônio Garcia
dc.creatorSantos, Eduardo José dos
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/2863457276816692eng
dc.date.accessioned2019-09-11T15:36:04Z
dc.date.issued2019-02-26
dc.description.abstractThe Trypanosoma cruzi, etiologic agent of Chagas disease is a flagellate protozoan transmitted by insect bugs (Reduvidae:Triatomine) to humans and wild mammals. The T. cruzi contains DNA in the nucleus (nDNA) and in the mitochondrion (kDNA). The kinetoplastid protozoan comprises maxicircles and and minicircles kDNA network sequences that integrate in the host’s cell genome. Insertional integrations of kDNA sequences bear high affinity to retrotransposable LINE-1 randomly distributed in the genome of somatic and germ line cells, and, thus generate an increasing diversity due to recombination and reshuffling. However, the profiles of kDNA integrations into the human genome in different Brazilian Ecosystems are unknown. In this regard, the ratio of transfer of T. cruzi minicircles sequences into the human genome was south. The study consisted of analyses of 36 members of two families from São Felipe-Bahia where Chagas disease is endemic. The study showed that 22% (8/36) families’ members had the diagnoses of the disease by immunofluorescence (IF) and enzyme-linked immunosorbant assay (ELISA). Yet, the PCR assays showed 61% (22/36) of families’ members had kDNA and nDNA assays positive for the T. cruzi infection. In order to detect the kDNA integration sites in the human genome, a tpTAIL-PCR (Targeted Primer Thermal Assymetric Interlaced-PCR), which consisted in combination of primers derived from T. cruzi minicircle conserved sequence with human LINE-1 sequence derived primers, was employed. The amplicon sequences obtained were subjected to homology analyses in Blast software. The hybrid kDNA-human DNA sequences revealed lateral and vertical transfer of T. cruzi minicircles into the genome of Chagas parents and progeny. Unravel of dynamics of mutations contributes to define variable profiles of kDNA minicircle sequence insertions into the human genome at different Ecosystems.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Franciele Moreira (francielemoreyra@gmail.com) on 2019-09-11T15:27:02Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eduardo José dos Santos - 2019.pdf: 4346886 bytes, checksum: d8a881b9ddc5408ae1dd36ccc508a9a4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)eng
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dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2019-09-11T15:36:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Eduardo José dos Santos - 2019.pdf: 4346886 bytes, checksum: d8a881b9ddc5408ae1dd36ccc508a9a4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2019-02-26eng
dc.description.resumoO Trypanosoma cruzi, agente etiológico da doença de Chagas, é um protozoário flagelado que pode ser transmitido por insetos hematófagos da família Reduviidae. O T. cruzi possui DNA no núcleo (nDNA) e na mitocôndria (kDNA). O kDNA é composto de maxicírculos e minicírculos concatenados em uma extensa rede involucrada pelo cinetoplasto. Sequências de minicírculos de kDNA podem se inserir no genoma de célula hospedeira. A inserção de sequências de minicírculos ocorre com maior frequência em retrotransposons LINE-1, tem distribuição randômica em células somáticas e germinativas de parentais e progênies, e aumenta a diversidade mediante rearranjos e recombinação nos sítios de integração. Contudo, o perfil de integração de minicírculos de kDNA em chagásicos de diferentes regiões do Brasil ainda é pouco conhecido. A análise da transferência lateral e vertical de minicírculos de kDNA em 36 indivíduos de duas famílias de São Felipe, Estado da Bahia revelou que 22% (8/36) dos investigados tiveram diagnóstico de doença de Chagas pelos testes imunofluorescência indireta (IF) e imunoensaio enzymático (ELISA). Todavia, os testes de ácidos nucleicos (PCR) mostraram que 61% (22/36) dos investigados foram positivos para kDNA e nDNA, e, portanto, eram portadores da doença de Chagas. Em seguida, foi utilizada uma metodologia com base na combinação de iniciadores de região conservada de minicírculos de kDNA de T. cruzi e de sequência de DNA humano (tpTAIL-PCR: Targeted Primer Thermal Assymetric Interlaced-PCR), para identificar os sítios de integração do kDNA. Os amplicons foram sequenciados e submetidos à análise de homologia pelo software Blast. Os resultados comprovam transferência horizontal e vertical de sequências de minicírculos de kDNA no genoma do chagásico. O entendimento da dinâmica dessas mutações contribui para a identificação de padrões de inserções de sequências de minicírculos de kDNA no genoma de indivíduos de diferentes Ecossistemaseng
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESeng
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationSANTOS, E. J. Análise da herança do DNA do Trypanosoma cruzi em parentais e progênies de chagásicos de famílias de São Felipe – Bahia. 2019. 106 f. Dissertação (Mestrado em Genética e Biologia Molecular) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2019.eng
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/10010
dc.languageporeng
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáseng
dc.publisher.countryBrasileng
dc.publisher.departmentInstituto de Ciências Biológicas - ICB (RG)eng
dc.publisher.initialsUFGeng
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Genética e Biologia Molecular (ICB)eng
dc.rightsAcesso Aberto
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectTrypanosoma cruzipor
dc.subjectkDNApor
dc.subjectDoença de Chagaspor
dc.subjectRetrotransposonspor
dc.subjectTrypanosoma cruzieng
dc.subjectChagas diseaseeng
dc.subject.cnpqBIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULAReng
dc.titleAnálise da herança do DNA do Trypanosoma cruzi em parentais e progênies de chagásicos de famílias de São Felipe – Bahiaeng
dc.typeDissertaçãoeng

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