Análise proteômica da fase leveduriforme do fungo patogênico Paracoccidioides sp durante a privação de nitrogênio

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dc.contributor.advisor1Borges, Clayton Luiz
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/8867708267053410por
dc.contributor.referee1Borges, Clayton Luiz
dc.contributor.referee2Bailão, Alexandre Melo
dc.contributor.referee3Brito, Wesley de Almeida
dc.contributor.referee4Casaletti, Luciana
dc.contributor.referee5Pereira, Maristela
dc.creatorCruz-Leite, Vanessa Rafaela Milhomem
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/4011621053709012por
dc.date.accessioned2015-05-19T14:14:18Z
dc.date.issued2014-03-13
dc.description.abstractThe fungi of the genus Paracoccidioides sp are etiologic agents of disease paracoccidioidomycosis (PCM), are termodimórficos and have the ability to move the saprobiótica form to yeast form at a temperature around 37 ° C. The uptake is essential for the growth and adaptation of the fungus in host tissue, where nitrogen-dependent pathways have close relationship with pathogenicity. Pathogenic organisms possess a regulatory system called Nitrogen Catabolic Represion which is induced when nitrogen availability is limiting in surround causing the expression of genes necessary for nutrient uptake when preferred sources such as glutamine and ammonia are scarce. This regulatory process comprises a complex system in the infectious process. This study aims to identify proteins regulated by nitrogen depletion, where the pathogenic fungus Pb01-like was analyzed as a proteomic response. Pb01-like was grown in minimal medium control MMcM (+N) and treated MMcM (-N) for 6 hours at 37 ° C, cytoplasmic proteins were extracted and subjected to tryptic digestion and quantification. The proteomic profile revealed an expression of 135 proteins, 40 proteins induced or identified the treaty, 58 repressed or identified control and 44 proteins were expressed constitutively. In silico analyzes showed that the gene is regulated by formamidase areA transcription factor that responds conditions of nitrogen depletion in Aspergillus nidulans and the surrounding medium the enzymatic activity for the gene of formamidase Pb01-like induced depletion of nitrogen during. The amino acid sequence of the regulatory gene areA important in the metabolism of nitrogen was aligned between Pb01-like, Pb18, Aspergillus nidulans and Neurospora crasssa where this alignment showed high identity and homology of conserved zinc finger domains and DUF 1752. Metabolic pathways such as fermentation, gluconeogenesis, protein synthesis, nitrogen metabolism were induced for the depletion of nitrogen, showing a possible modulation of the metabolism of the fungus in order to be able to adapt to environments with nitrogen limitation.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Luanna Matias (lua_matias@yahoo.com.br) on 2015-05-15T19:59:02Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Vanessa Rafaela Milhomem Cruz Leite - 2014.pdf: 2374224 bytes, checksum: bbdd09c7a011fbfa20239423f0d7f3fb (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5)eng
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dc.description.resumoOs fungos do genêro Paracoccidioides sp são agentes etiológicos da doença paracoccidioidomicose (PCM), são termodimórficos e possuem a capacidade de transitar da forma miceliana para a forma de levedura à temperatura em torno de 37°C. A captação de nitrogênio é essencial para o crescimento e adaptação do fungo em tecido hospedeiro, onde vias dependentes de nitrogênio possuem estreita relação com a patogenicidade. Organismos patogênicos possuem um sistema regulatório conhecido como Nitrogen Catabolic Repression que é induzido quando a disponibilidade de nitrogênio é limitante no meio, ocasionando a expressão de genes necessários para a captação do nutriente quando fontes preferenciais como a glutamina e amônia estão escassas. Esse processo regulatório compõe um complexo sistema no processo infeccioso. Este trabalho tem o objetivo de identificar proteínas reguladas pela depleção de nitrogênio, onde o fungo patogênico Pb01-like foi analisado quanto sua resposta proteômica. Pb01-like foi cultivado em meio mínimo controle MMcM (+N) e tratado MMcM (-N) por 6 horas a 37°C, as proteínas citoplasmáticas foram extraídas e submetidas a quantificação e digestão triptica. O perfil proteômico revelou uma expressão 135 proteínas, sendo 40 proteínas induzidas ou identificadas apenas no tratado, 58 proteínas reprimidas ou identificadas apenas no controle e 44 foram expressas constitutivamente. Análises in silíco revelou que o gene da formamidase é regulado pelo fator de transcrição areA, em Aspergillus nidulans que responde as condições de depleção de nitrogênio do meio circundante sendo a atividade enzimática para o gene da formamidase de Pb01-like induzida durante a depleção de nitrogênio. A sequência de aminoácidos do fator de transcrição areA importante regulador do metabolismo de nitrogênio foi alinhado entre Pb01-like, Pb18, Aspergillus nidulans e Neurospora crasssa onde esse alinhamento demonstrou uma alta identidade e homologia dos domínios conservados dedo de zinco e DUF 1752. Vias metabólicas como a fermentação, gliconeogênese, síntese de proteínas, metabolismo de nitrogênio estavam induzidas durante a depleção de nitrogênio, demonstrando uma possível modulação do metabolismo do fungo afim de conseguir adaptar-se a ambientes com limitação de nitrogênio.por
dc.description.sponsorshipCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESpor
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationCRUZ-LEITE, Vanessa Rafaela Milhomem. Análise proteômica da fase leveduriforme do fungo patogênico Paracoccidioides sp durante a privação de nitrogênio. 2014. 90 f. Dissertação (Mestrado em Genética e Biologia Molecular) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2014.por
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/4543
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáspor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.departmentInstituto de Ciências Biológicas - ICB (RG)por
dc.publisher.initialsUFGpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Genetica e Biologia Molecularpor
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectParacoccidioides sppor
dc.subjectMetabolismo de nitrogêniopor
dc.subjectProteômicapor
dc.subjectProteomicseng
dc.subjectNitrogen metabolismeng
dc.subject.cnpqGENETICA::GENETICA MOLECULAR E DE MICROORGANISMOSpor
dc.thumbnail.urlhttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/retrieve/20006/Disserta%c3%a7%c3%a3o%20-%20Vanessa%20Rafaela%20Milhomem%20Cruz%20Leite%20-%202014.pdf.jpg*
dc.titleAnálise proteômica da fase leveduriforme do fungo patogênico Paracoccidioides sp durante a privação de nitrogêniopor
dc.title.alternativeProteomic analysis of the yeast phase of the pathogenic fungus Paracoccidioides sp during deprivation of nitrogeneng
dc.typeDissertaçãopor

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Mestrado em Genética e Biologia Molecular (ICB)