Avaliação da resposta imune celular a antígenos recombinantes do Mycobacterium leprae e potencial aplicação para o diagnóstico da hanseníase paucibacilar

dc.contributor.advisor1Stefani, Mariane Martins de Araújo
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/5581414958714905
dc.contributor.referee1Stefani, Mariane Martins de Araújo
dc.contributor.referee2Grossi, Maria Aparecida Faria
dc.contributor.referee3Moraes, Mílton Osório
dc.contributor.referee4Kipinis, Ana Paula Junqueira
dc.contributor.referee5Araújo Filho, João Alves de
dc.creatorSampaio, Lucas Henrique Ferreira
dc.creator.Latteshttps://lattes.cnpq.br/0189199307462751
dc.date.accessioned2024-09-19T20:37:53Z
dc.date.available2024-09-19T20:37:53Z
dc.date.issued2011-06-30
dc.description.abstractTitle: The evaluation of cellular immune responses to Mycobacterium leprae recombinant antigens and potential application for the diagnosis of paucibacillary leprosy. Introduction: Leprosy is a chronic and debilitating infectious disease that is characterized by a spectrum of dermato-neurological manifestations associated with different patterns of immune responses. At one end of the spectrum paucibacillary patients (PB) which include tuberculoid (TT) and borderline tuberculoid (BT) patients mount a strong cellular immune response. On the extreme multibacillary (MB) patients including borderline-borderline (BB), borderline-lepromatous (BL) and lepromatous (LL) forms, respond to infection with vigorous antibody production. The diagnosis of leprosy is based on clinical manifestations hampering the early diagnosis before the onset of sequelae. The development laboratory tests applicable for early leprosy diagnosis is considered essential to reduce possible sources of transmission and the number of patients with physical disabilities. Methods: This work investigated the immune reactivity of a panel of 41 M. leprae (ML) recombinant proteins. The immune reactivity to ML proteins was evaluated by the production of IFNy, measured by ELISA, in the supernatants of 24 hours cultures of heparinized whole blood (whole blood assays/WBA) stimulated with ML antigen (10ug/ml). Study groups were leprosy patients both PB (TT / BT) and MB (BL / LL), newly diagnosed, untreated, classified according to Ridley and Jopling criteria. Household contacts of MB patients (HHC), HIV-1 negative patients with pulmonary tuberculosis (TB) and healthy individuals from the same endemic area (EC) were also investigated. In silico predictions were used to investigate the level of identity of the ML proteins with counterparts in other mycobacteria and to assesse the presence of potential T cell epitopes. For a selected group of immunogenic and specific ML antigens, the profile of 14 cytokines/chemokines induced in WBA was also investigated by Multiplex plataform. Results and Conclusions: The WBA results identified 11 out of 41 M. leprae recombinant proteins (ML0405, ML2055, ML2331, ML0840, ML1623, ML1556, MLI632, ML1685, ML0276, ML2044, 46f) that were classified as immunogenic and capable of inducing specific cellular immune response. These ML antigens were considered to have potential application for the development of laboratory tests for the diagnosis of PB leprosy. The same pattern of immunoreactivity identified among PB leprosy patients was observed among HHC, while MB leprosy, TB patients and healthy individuals did not respond to these antigens. In silico predictions of immunogenicity and specificity were not confirmed by ex vivo WBA results. The multiplex cytokine study with a selected group of ML antigens showed that besides IFNy, patients with PB leprosy produce other cytokines characteristic of Th1 cells (IL-2 and IL-12). Nevertheless these results that IFNy remained the best immunological marker of cellular immune response of PB patients to recombinant M. leprae proteins. MB leprosy patients secrete mainly Th2 type cytokines such as IL-4 and IL-5 in response to recombinant ML proteins. None of the 14 cytokines/chemokines analyzed in the multiplex was able to distinguish the cellular immune responses of PB patients from the majority of HHC. Although the majority of HHC response identically to PB, we observed that some individuals at greater risk of leprosy infection can mount a Th2 response, similar to MB patients.eng
dc.description.resumoTitulo: Avaliação da resposta imune celular a antígenos recombinantes do Mycobacterium leprae e potencial aplicação para o diagnóstico da hanseníase paucibacilar Introdução: A hanseníase é uma doença infecciosa crônica incapacitante que se caracteriza por um espectro de manifestações dermato-neurológicas associadas a diferentes padrões de resposta imune. Em um pólo, pacientes paucibacilares (PB) que incluem as formas tuberculóide (TT) e borderline tuberculóide (BT) montam forte resposta imune celular. No outro extremo do espectro pacientes multibacilares (MB) que incluem as formas bordeline-borderline (BB), borderline-lepromatosa (BL) e lepromatosa (LL) respondem a infecção com vigorosa produção de anticorpos. O diagnóstico da hanseníase se baseia nas manifestações clínicas o que dificulta o diagnóstico precoce antes do surgimento de sequelas. O desenvolvimento de métodos laboratoriais para o diagnóstico precoce da hanseníase é considerado fundamental para reduzir possíveis fontes de transmissão e o número de pacientes com deficiências físicas. Métodos: Este trabalho pesquisou a reatividade celular a um painel de 41 proteínas recombinantes do M. leprae mediante avaliação da produção de IFNy mensurado por ELISA em plasma de cultura de 24 horas de sangue total heparinizado (ensaio de sangue total/EST) corri o antígeno (10pg/ml). Os grupos de estudo foram pacientes com hanseníase PB (TT/BT), MB (BL/LL) recém diagnosticados, não tratados, classificados segundo critérios de Ridley e Jopling. Foram também investigados contatos domiciliares de pacientes MB (HHC), pacientes com tuberculose pulmonar (TB) e indivíduos sádios recrutados na mesma área endêmica (CE). Previsões in silico foram utilizadas para investigar o nível de identidade das proteínas do M. leprae com homólogos em outras micobactérias e a presença de potenciais epítopos de células-T. O perfil de 14 citocinas/quimiocinas induzidas frente a estimulação com antígenos selecionados do M. leprae foi investigado pela plataforma Multiplex. Resultados e conclusões: Os resultados do EST identificaram 11 proteínas recombinantes do M. leprae (ML0405, ML2055, ML2331; ML0840, ML1623, ML1556, ML1632, ML1685, ML0276, ML2044, 46f) classificadas como imunogênicas e indutoras de resposta imune celular específica, com potencial aplicação no diagnóstico laboratorial da hanseníase PB. Estes antígenos foram reconhecidos por pacientes com hanseníase PB e HHC, enquanto pacientes com hanseníase MB, pacientes com TB e controles saudáveis não responderam as proteínas do ML. As previsões in silico de imunogenicidade e especificidade não foram confirmadas pelos resultados do EST ex vivo. O estudo multiplex com citocinas produzidas frente a um painel selecionado de protéinas do ML mostrou que os pacientes com hanseníase PB além do IFNy, produzem outras citocinas características das células Thl (IL-2 e IL-12). Entretanto, estes resultados indicaram que o IFNy permaneceu como o melhor marcador imunológico da resposta imune celular de pacientes PB as proteínas recombinantes do M. leprae. Os pacientes com hanseníase MB secretam citocinas produzidas por células do tipo Th2, principalmente IL-4 e IL-5 em resposta as proteínas recombinantes do M. leprae. Nenhuma das 14 citocinas/quimiocinas analisadas diferenciou a resposta imune celular de pacientes PB da maioria dos HHC. Apesar de a maioria dos HHC responderem de forma idêntica aos pacientes PB, observamos que alguns individuos sob maior risco de infecção podem montar uma resposta imune Th2, de forma semelhante aos pacientes MB.
dc.identifier.citationSAMPAIO, L. H. F. Avaliação da resposta imune celular a antígenos recombinantes do Mycobacterium leprae e potencial aplicação para o diagnóstico da hanseníase paucibacilar. 2011. 127 f. Tese (Doutorado em Medicina Tropical e Saúde Pública) - Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública, Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2024.
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/13375
dc.languagepor
dc.publisherUniversidade Federal de Goiás
dc.publisher.countryBrasil
dc.publisher.departmentInstituto de Patologia Tropical e Saúde Pública - IPTSP (RMG)
dc.publisher.initialsUFG
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Medicina Tropical e Saúde Publica (IPTSP)
dc.rightsAttribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internationalen
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectHanseníasepor
dc.subjectDiagnóstico laboratorialpor
dc.subjectImunidade celularpor
dc.subjectLeprosyeng
dc.subjectLaboratory diagnosiseng
dc.subjectCellular immunityeng
dc.subject.cnpqCIENCIAS DA SAUDE::SAUDE COLETIVA
dc.titleAvaliação da resposta imune celular a antígenos recombinantes do Mycobacterium leprae e potencial aplicação para o diagnóstico da hanseníase paucibacilar
dc.title.alternativeThe evaluation of the cellular immune response to recombinant antigens of Mycobacterium leprae and potential application for the diagnosis of paucibacillary leprosyeng
dc.typeTese

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