Distribuição de células-tronco adulta humana em diferentes fases do desenvolvimento dentário: uma análise metodológica dos constituintes histológicos

Página do item simplificado
dc.contributor.advisor-co2Souza, Pedro Paulo Chaves de
dc.contributor.advisor1Vêncio, Eneida Franco
dc.contributor.advisor1Latteshttp://lattes.cnpq.br/0539115059597412eng
dc.contributor.referee1Vêncio, Eneida Franco
dc.contributor.referee2Souza, Pedro Paulo Chaves de
dc.contributor.referee3Estrela, Carlos
dc.creatorCarvalho, Stephany Pimenta
dc.creator.Latteshttp://lattes.cnpq.br/7116932293488359eng
dc.date.accessioned2019-12-30T14:15:12Z
dc.date.issued2019-12-10
dc.description.abstractTissue loss and the reestablishment of its function is challenging in regenerative medicine. A cellular subpopulation, called adult stem cells, is fundamental in tissue repair. These cells are capable of self-renewal and differenciation, playing an important role in tissues regenerative process in the whole organism. Dental structures are promising sources of these cells for easy access. The distribution of adult stem cells in dental structures is still poorly understood. Dental pulp removal for laboratory studies still faces methodological impasse due to the lack of protocol standardization. The aim of this study was to topographically locate adult pulp stem cells and from dental associated structures at various stages of dental development and to evaluate the effectiveness of tissue collection methods. Adult pulp and dental associated tissues stem cells were identified by immunostaining and gene expression in human deciduous and permanent teeth at various stages of development. For the topographic study, 35 teeth were obtained: 8 deciduous teeth, 12 open-apex permanent teeth, 5 closed-apex permanent teeth and 10 pericoronal follicles. After extraction, teeth were decalcified in pH 7.0 EDTA solution and cut out for immunohistochemical analysis with CD10, CD44, CD90, Nanog and Oct-3/4 monoclonal antibodies. For gene expression study, fresh tissues were obtained by enzymatic digestion with 3 mg/ml type IV collagenase. Tissue preservation analysis was performed in 3 open-apex permanent teeth sectioned in the cementoenamel junction. To remove dental pulp, two methods were followed: mechanical removal with endodontic file or unhandled dental pulp enzymatic digestion. The results showed differential presence of stem cell markers in dental structures and topographic constituents. CD44 was expressed exclusively in odontoblastic layer of open-apex permanent teeth at root region. Pulp and dental associated tissue capillary vessels and peripheral nerves expressed CD90 as well as in cementoblasts and periodontal ligament fibers. Only fibroblasts from dental papilla were positive for CD10, confirmed by RT-PCR. No expression was observed by transcriptional pluripotency factors Nanog and Oct-3,4. unhandled dental pulp enzymatic digestion was more effective in removing cellular constituents from dental pulp. The maintenance of odontoblastic layer was compromised by mechanical method. This study showed distinct topographic distribution of adult stem cell subpopulations in various stages of dental development. Permanent teeth with incomplete rhizogenesis appear to be a potential source of adult stem cells in in vitro studies. Choosing appropriate methods for dental pulp removal is essential for preserving its stem cell subpopulations, and unhandled dental pulp enzymatic digestion is more effective than mechanical method.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Liliane Ferreira (ljuvencia30@gmail.com) on 2019-12-18T15:27:47Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Stephany Pimenta Carvalho - 2019.pdf: 2244959 bytes, checksum: fecdd83dfa6cc8d5f87474946a8bd2a4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)eng
dc.description.provenanceApproved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2019-12-30T14:15:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Stephany Pimenta Carvalho - 2019.pdf: 2244959 bytes, checksum: fecdd83dfa6cc8d5f87474946a8bd2a4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5)eng
dc.description.provenanceMade available in DSpace on 2019-12-30T14:15:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Stephany Pimenta Carvalho - 2019.pdf: 2244959 bytes, checksum: fecdd83dfa6cc8d5f87474946a8bd2a4 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2019-12-10eng
dc.description.resumoA perda tecidual e o restabelecimento de sua função representam desafios na medicina regenerativa. Uma subpopulação celular, as células-tronco adulta, são fundamentais no reparo dos tecidos. Estas células possuem capacidade de autorrenovação e diferenciação, desempenhando função importante no processo regenerativo dos diversos tecidos do organismo. Estruturas dentárias tem se mostrado fontes promissoras dessas células pela facilidade de acesso. A distribuição de células-tronco adulta nas estruturas dentárias ainda é pouco conhecida. A remoção da polpa dentária para estudos laboratoriais ainda enfrenta impasses metodológicos pela falta de padronização de protocolos. O objetivo deste estudo foi localizar topograficamente células-tronco adulta pulpar e de estruturas associadas ao dente nas diversas fases de desenvolvimento e avaliar a eficácia de dois métodos de coleta tecidual. Células-tronco adulta pulpar e de estruturas associadas foram identificadas por imunomarcação e expressão gênica em dentes decíduos e permanentes humano nas diversas fases do desenvolvimento. Para o estudo topográfico, foram obtidos 34 dentes, sendo 8 dentes decíduos, 11 dentes permanentes de ápice aberto, 5 dentes permanentes de ápice fechado e 10 folículos pericoronários. Após exodontia, os dentes foram descalcificados em solução de EDTA, pH 7.0 e recortados para análise imunoistoquímica com anticorpos monoclonais CD10, CD44, CD90, Nanog e Oct-3/4. Para estudo da expressão gênica, foram obtidos tecidos à fresco seguido de sua remoção por digestão enzimática com 3 mg/ml de colagenase tipo IV. A análise da preservação tecidual foi realizada a partir de 3 dentes permanentes de ápice aberto seccionados na região amelocementária para remoção da polpa dentária por dois métodos: mecânico com lima endodôntica e digestão enzimática sem manipulação pulpar. Os resultados mostraram a presença diferencial de marcadores de células-tronco nos constituintes tecidual e topográfico. O CD44 foi expresso exclusivamente na camada odontoblástica da região radicular de dentes permanentes de ápice aberto. Vasos capilares e nervos periféricos pulpares e de tecidos associados expressaram CD90 como também em cementoblastos e fibra do ligamento periodontal. Apenas fibroblastos localizados da papila dentária mostraram-se positivos para CD10, confirmados pela RT-PCR. Nenhuma expressão foi observada por fatores transcricionais de pluripotência Nanog e Oct-3/4. A digestão enzimática do tecido sem manipulação mostrou-se mais eficaz na remoção dos constituintes celulares do tecido pulpar. A manutenção da camada odontoblástica mostrou-se comprometida pelo método mecânico. Este estudo evidenciou distribuição topográfica distinta de subpopulações de células-tronco adulta nas diversas fases de desenvolvimento dentário. O dente permanente com rizogênese incompleta parece ser uma fonte potencial de células-tronco adulta em estudos in vitro. A escolha de métodos adequados na remoção do tecido pulpar é essencial na preservação de subpopulações de células-tronco pulpares, sendo a digestão enzimática sem manipulação pulpar mais eficaz do que o método mecânico.eng
dc.description.sponsorshipFundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEGeng
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationCARVALHO, S.P. Distribuição de células-tronco adulta humana em diferentes fases do desenvolvimento dentário: uma análise metodológica dos constituintes histológicos. 2019. 55 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal de Goiás, Goiânia, 2019.eng
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/10246
dc.languageporeng
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáseng
dc.publisher.countryBrasileng
dc.publisher.departmentFaculdade de Odontologia - FO (RG)eng
dc.publisher.initialsUFGeng
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Odontologia (FO)eng
dc.rightsAcesso Aberto
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/
dc.subjectCélulas-tronco adultapor
dc.subjectPolpa dentáriapor
dc.subjectLigamento periodontalpor
dc.subjectFolículo dentáriopor
dc.subjectImunoistoquímicapor
dc.subjectMétodospor
dc.subjectAdult stem celleng
dc.subjectDental pulpeng
dc.subjectPeriodontal ligamenteng
dc.subjectDental follicleeng
dc.subjectImmunochemistryeng
dc.subjectMethodseng
dc.subject.cnpqCIENCIAS DA SAUDE::ODONTOLOGIAeng
dc.titleDistribuição de células-tronco adulta humana em diferentes fases do desenvolvimento dentário: uma análise metodológica dos constituintes histológicoseng
dc.title.alternativeHuman adult stem cell distribution in different stages of dental development: a methodological analysis of histological constituentseng
dc.typeDissertaçãoeng

Arquivos

Pacote Original
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
Dissertação - Stephany Pimenta Carvalho - 2019.pdf
Tamanho:
2.14 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descrição:
Baixar
Licença do Pacote
Agora exibindo 1 - 1 de 1
Nenhuma Miniatura disponível
Nome:
license.txt
Tamanho:
2.11 KB
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descrição:
Baixar

Coleções

Mestrado em Odontologia (FO)