Caracterização fenotípica e genotípica de staphylococcus aureus isolados de queijo minas frescal industrial e artesanal

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dc.contributor.advisor1André, Maria Cláudia Dantas Porfirio Borges
dc.contributor.advisor1Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4700034D1por
dc.contributor.referee1Campos, Maria Raquel Hidalgo
dc.contributor.referee2Borges, Liana Jayme
dc.contributor.referee3André, Maria Cláudia Dantas Porfírio Borges
dc.creatorFerreira, Mariana de Andrade
dc.creator.Latteshttp://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4462784Y5por
dc.date.accessioned2016-05-13T12:05:05Z
dc.date.issued2015-08-28
dc.description.abstractStaphylococcus aureus is an important foodborne pathogen, able to produce extracellular toxins and to express antimicrobial resistance. Among the foods involved in staphylococcal food poisoning, stands out the cheese, especially when manufactured under improper hygienic and sanitary conditions. The objectives of this study were to characterize Staphylococcus aureus isolated from artisanal and industrialized Minas frescal cheeses, to determine their antimicrobial susceptibility profile as well as the genetic similarity among the isolates. The isolates were also tested for staphylococcal enterotoxins (SE) genes and other virulence factors. Fifty-six artisanal raw milk cheeses sold at street fairs and 10 industrialized cheeses commercialized in supermarkets of Goiânia, Goiás were analyzed between June and August 2014. S. aureus was confirmed in 19 samples (33.9%) of artisanal cheese by detection of femA gene, in which 29 isolates were obtained. These isolates were submitted to the antimicrobial susceptibility test and classified into nine different profiles (A - I). Thirteen isolates (44.8%) were resistant to penicillin and three (10.3%) to tetracycline, with two (7.4%) resistant to both. The Multiplex PCR technique was performed to detect virulence genes that code for the production of hemolysins (Hla and Hlb), toxic shock syndrome toxin (TSST-1), exfoliative toxins (ETa and ETb) and enterotoxins (SEA - SEE, SEG - SEJ, SEM - SEO). Genes encoding TSST-1 and exfoliative toxins were not detected. All the isolates amplified for the hla gene and 14 (48.3%) for the hbl gene. The seh gene was the most frequently detected (n=11, 37.9%) followed by seo gene (n = 3; 10.3%), seg, sem and sen genes (n = 2, 6.9%) and sec and sei genes (n = 1, 3.4%). In one isolate (3.4%), four enterotoxins genes were detected, and in another, six (3.4%). The comparison performed by Pulsed Field Gel Electrophoresis technique revealed 18 different DNA banding patterns which were grouped into five clusters. The genotyping found high genetic similarity among the isolates. Identical isolates were obtained from different samples and one sample showed more than one genetically different isolate. It was identified up to four different isolates from the same sample. The high prevalence of S. aureus in a widely consumed product like Minas fresh cheese, as well as the detection of toxin encoding genes identified in this study, warns of the necessity to reduce the contamination levels in this type of cheese through monitoring and controling the production and trade of the product.eng
dc.description.provenanceSubmitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2016-05-12T20:45:00Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Mariana de Andrade Ferreira - 2015.pdf: 2863875 bytes, checksum: 62c67ecc0abf8022b7bf54c6de62a20c (MD5) license_rdf: 19874 bytes, checksum: 38cb62ef53e6f513db2fb7e337df6485 (MD5)eng
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dc.description.resumoS. aureus é um importante patógeno de origem alimentar com capacidade de produção de toxinas extracelulares e resistência antimicrobiana. Entre os alimentos envolvidos em intoxicação alimentar estafilocócica, destaca-se o queijo, principalmente quando fabricado em condições higienicossanitárias impróprias. Os objetivos deste estudo foram caracterizar S. aureus isolados de queijo Minas frescal artesanal e industrializado, determinar o perfil de suscetibilidade a antimicrobianos, bem como determinar a similaridade genética entre os isolados. Os isolados foram também testados para genes de enterotoxinas estafilocócicas (SE) e outros fatores de virulência. Foram analisadas 56 amostras de queijo Minas frescal de fabricação artesanal e dez de fabricação industrial comercializados em feiras livres e supermercados de Goiânia-GO, coletadas entre junho e agosto de 2014. S. aureus foi confirmado em 19 amostras (33,9) de queijo artesanal através da detecção do gene femA, onde 29 isolados foram obtidos. Estes isolados foram submetidos ao teste de susceptibilidade aos antimicrobianos e classificados em nove diferentes perfis (A - I). Treze isolados (44,8%) foram resistentes à penicilina e três (10,3%) à tetracilina, sendo dois (7,4%) resistentes a ambos. A técnica de multiplex PCR foi realizada para a detecção de genes de virulência que codificam a produção de hemolisinas (Hla e Hlb), TSST-1, toxinas esfoliativas (ETa e ETb) e enterotoxinas (EEA - EEE, EEG - EEJ, EEM - EEO). Genes que codificam as toxinas TSST-1 e esfoliativa não foram detectados. Todos os isolados amplificaram para o gene hla e 14 (48,3%) para o gene hlb. O gene seh foi o mais frequentemente detectado (n=11; 37,9%), seguido do gene seo (n=3; 10,3%), genes seg, sem, sen (n=2; 6,9%) e os genes sec e sei (n=1; 3,4%). Um isolado (3,4%) amplificou genes para quatro enterotoxinas e outro (3,4%) para seis. A comparação dos 29 isolados de S. aureus feita por PFGE revelou 18 padrões de bandas diferentes de DNA agrupados em cinco clusters. A genotipagem demonstrou alta similaridade genética entre os isolados. Isolados idênticos foram obtidos de amostras diferentes e uma mesma amostra apresentou mais de um isolado geneticamente diferente. Identificou-se até quatro diferentes isolados da mesma amostra. A alta prevalência de S. aureus nas amostras de queijo Minas Frescal, bem como a detecção de genes para produção de toxinas, alertam para a necessidade de reduzir os níveis de contaminação neste tipo de queijo através de monitoramento e controle da produção e comércio do produto.por
dc.formatapplication/pdf*
dc.identifier.citationFERREIRA, M. A. Caracterização fenotípica e genotípica de staphylococcus aureus isolados de queijo minas frescal industrial e artesanal. 2015. 108 f. Dissertação (Mestrado em Nutrição e Saúde) - Universidade Federal de Goiás,Goiânia, 2015.por
dc.identifier.urihttp://repositorio.bc.ufg.br/tede/handle/tede/5564
dc.languageporpor
dc.publisherUniversidade Federal de Goiáspor
dc.publisher.countryBrasilpor
dc.publisher.departmentFaculdade de Nutrição - FANUT (RG)por
dc.publisher.initialsUFGpor
dc.publisher.programPrograma de Pós-graduação em Nutrição e Saúde (FANUT)por
dc.rightsAcesso Abertopor
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/
dc.subjectStaphylococcus aureuspor
dc.subjectResistência microbiana a medicamentospor
dc.subjectEnterotoxinaspor
dc.subjectMicrobiologia de alimentospor
dc.subjectStaphylococcus aureuseng
dc.subjectCheeseeng
dc.subjectAntimicrobial resistanceeng
dc.subjectStaphylococcal enterotoxineng
dc.subject.cnpqCIENCIAS DA SAUDE::NUTRICAOpor
dc.titleCaracterização fenotípica e genotípica de staphylococcus aureus isolados de queijo minas frescal industrial e artesanalpor
dc.title.alternativePhenotypic and genotypic characterization of staphylococcus aureus isolated from minas cheese industrial and artisanaleng
dc.typeDissertaçãopor

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